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大鼠抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)酶聯免疫檢測試劑盒使用說明書

點選次數✘╃:434 釋出時間✘╃:2020/6/4
提 供 商✘╃: 上海聯碩生物科技有限公司 資料大小✘╃:
圖片型別✘╃: 下載次數✘╃: 118
資料型別✘╃: DOC 瀏覽次數✘╃: 434
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詳細介紹✘╃: 檔案下載    

使用前仔細閱讀本說明書₪✘。酶聯免疫試劑盒是基於雙抗體夾心技術原理✘₪◕··,來檢測大鼠抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)✘₪◕··,只能用於研究用途✘₪◕··,不得用於醫學診斷₪✘。

    ✘╃:用於大鼠血清↟·◕◕、血漿及相關液體樣本中抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)測定₪✘。

工作原理✘╃:

本試劑盒採用的生物素雙抗體夾心酶聯免疫吸附法ELISA)測定樣品中大鼠抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)水平₪✘。向預先包被了抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)克隆抗體的酶標孔中加入抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)✘₪◕··,溫育;溫育後✘₪◕··,加入生物素標記的抗APSA抗體₪✘。再與鏈黴親和素-HRP結合✘₪◕··,形成免疫複合物✘₪◕··,再經過溫育和洗滌✘₪◕··,去除未結合的酶✘₪◕··,然後加入底物A↟·◕◕、B✘₪◕··,產生藍色✘₪◕··,並在酸的作用下轉化成終的黃色₪✘。顏色的深淺與樣品中抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)的濃度呈正相關₪✘。

試劑盒組成 ✘╃:

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

儲存

說明書

1

1

 

封板膜

2片(48

2片(96

 

密封袋

1

1

 

酶標包被板

1×48

1×96

2-8℃儲存

標準品✘╃:80 U/L

0.5ml×1

0.5ml×1

2-8℃儲存

標準品稀釋液

3ml×1

6ml×1

2-8℃儲存

鏈黴親和素-HRP

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃儲存

生物素標記的抗APSA抗體

0.5ml×1

1 ml×1

2-8℃儲存

顯色劑A

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃儲存

顯色劑B

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃儲存

終止液

3ml×1

6ml×1

2-8℃儲存

濃縮洗滌液

20ml×20倍)×1

20ml×30倍)×1

2-8℃儲存

需要而未提供的試劑和器材✘╃:

  • 37恆溫箱
  • 標準規格酶標儀
  • 精密移液器及一次性吸頭
  • 蒸餾水
  • 一次性試管
  • 吸水紙

 

注意事項✘╃:

  • 從2-8℃取出的試劑盒✘₪◕··,在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘₪✘。酶標包被板開封后如未用完✘₪◕··,板條應裝入密封袋中儲存₪✘。
  • 各步加樣均應使用加樣器✘₪◕··,並經常校對其準確性✘₪◕··,以避免試驗誤差
  • 嚴格按照說明書的操作進行✘₪◕··,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
  • 免交叉汙染✘₪◕··,要避免重複使用手中的吸頭和封板膜₪✘。
  • 不用的其它試劑應包裝好或蓋好₪✘。不同批號的試劑不要混用₪✘。保質前使用₪✘。
  • 底物B對光敏感✘₪◕··,避免長時間暴露於光下₪✘。

 

洗板方法✘╃:

1.手工洗板方法✘╃:甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙✘₪◕··,酶標板朝下用力拍幾次;將稀釋後的洗滌液至少0.35ml注入孔內✘₪◕··,浸泡1-2分鐘₪✘。根據需要✘₪◕··,重複此過程數次₪✘。

2.自動洗板✘╃:如果有自動洗板機✘₪◕··,應在熟練使用後再用到正式實驗過程中

 

標本要求✘╃: 

1.不能檢測含NaN3的樣品✘₪◕··,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性₪✘。

2.標本採集後儘早進行提取✘₪◕··,提取按相關文獻進行✘₪◕··,提取後應儘快進行實驗₪✘。若不能馬上進行試驗✘₪◕··,可將標本放於-20℃儲存✘₪◕··,但避免反覆凍融₪✘。

 

操作程式:

  • 標準品的稀釋✘╃:(本試劑盒提供原倍標準品一支✘₪◕··,使用者可按照下列圖表在小試管中進行稀釋₪✘。)

40 U/L

5號標準品

120μl的原倍標準品加入120μl標準品稀釋液

20 U/L

4號標準品

120μl的5號標準品加入120μl標準品稀釋液

10 U/L

3號標準品

120μl的4號標準品加入120μl標準品稀釋液

5 U/L

2號標準品

120μl的3號標準品加入120μl標準品稀釋液

2.5 U/L

1號標準品

120μl的2號標準品加入120μl標準品稀釋液

  • 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數₪✘。每個標準品和空白孔建議做復孔₪✘。每個樣品根據自己的數量來定✘₪◕··,能使用復孔的儘量做復孔₪✘。
  • 加樣✘╃: 1)空白孔✘₪◕··,空白對照孔不加樣品✘₪◕··,生物素標記的抗APSA抗體✘₪◕··,鏈黴親和素-HRP✘₪◕··,只加顯色劑A&B和終止液✘₪◕··,其餘各步操作相同;2)標準品孔✘╃:加入標準品50ul✘₪◕··,鏈黴親和素-HRP50ul(標準品中已事先整合好生物素抗體✘₪◕··,故不加);3)待測樣品孔✘╃:加入樣本40ul✘₪◕··,然後各加入抗APSA抗體10ul↟·◕◕、鏈黴親和素-HRP50ul✘₪◕··,蓋上封板膜✘₪◕··,輕輕震盪混勻✘₪◕··,37℃溫育60分鐘₪✘。 
  • 配液✘╃:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋後備用₪✘。
  • 洗滌✘╃:小心揭掉封板膜✘₪◕··,棄去液體✘₪◕··,甩幹✘₪◕··,每孔加滿洗滌液✘₪◕··,靜置30秒後棄去✘₪◕··,如此重複5次✘₪◕··,拍幹₪✘。
  • 顯色✘╃:每孔先加入顯色劑A50ul✘₪◕··,再加入顯色劑B50μl✘₪◕··,輕輕震盪混勻✘₪◕··,37℃避光顯色15分鐘. 
  • 終止✘╃:每孔加終止液50μl✘₪◕··,終止反應(此時藍色立轉黃色)₪✘。
  • 測定✘╃:以空白空調零✘₪◕··,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)₪✘。 測定應在加終止液後10分鐘以內進行₪✘。
  • 根據標準品的濃度及對應的OD值計算出標準曲線的直線迴歸方程✘₪◕··,再根據樣品的OD值在迴歸方程上計算出對應的樣品濃度₪✘。也可以使用各種應用軟體來計算₪✘。

 

操作程式總結✘╃:

檢測範圍✘╃:1.2 U/L -50 U/L

 

儲存✘╃:2-8₪✘。

有效期✘╃:6個月(2-8℃)₪✘。

 
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