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關於纖維素 DE-52的處理只需要簡單的幾步
  • 釋出日期·↟:2022-03-29      瀏覽次數·↟:291
    •   纖維素 DE-52為中等鹼性陰離子交換劑✘◕╃✘,柱層析用於吸附劑✘◕╃✘,用以分離提純多糖₪✘▩、肽₪✘▩、核苷酸₪✘▩、酶₪✘▩、血清組分和病毒等各種生物高分子▩✘。
       
        纖維素DE-52提取法純化多克隆抗體
        該法提取IgG簡便✘◕╃✘,既可小量提取✘◕╃✘,也可大量製備▩✘。
        1₪✘▩、批次提取法✘◕╃✘,稱取DEAE-纖維素(DE52)50g✘◕╃✘,置於1000ml燒杯中✘◕╃✘,先以蒸餾水漂浮除去細顆粒✘◕╃✘,再經酸鹼處理後✘◕╃✘,用0.01~0.05mol/L✘◕╃✘,pH8.0左右的磷酸鹽緩衝液(PB)平衡▩✘。將水分抽乾✘◕╃✘,或用布氏濾鬥(內放兩層濾紙)過濾✘◕╃✘,收集溼纖維素✘◕╃✘,以降低其離子強度▩✘。按1ml血清加溼重5g DE52✘◕╃✘,經過充分攪拌✘◕╃✘,置4℃吸附1h▩✘。上清液可再如此處理一次✘◕╃✘,即獲得較純的IgG▩✘。該法提取IgG簡便✘◕╃✘,既可小量提取✘◕╃✘,也可大量製備▩✘。
        2₪✘▩、Tris-Cl離子交換層析法▩✘。
       
        纖維素 DE-52處理方法·↟:
        關於纖維素 DE-52的處理只有簡單的幾步✘◕╃✘,如下·↟:
        1₪✘▩、先將乾粉的纖維素浸泡在蒸餾水中✘◕╃✘,一段時間大約3小時左右✘◕╃✘,我偏愛這個時間✘◕╃✘,去除雜質✘◕╃✘,抽乾一下▩✘。
        2₪✘▩、再用0.5mol/l的HCl溶液浸泡2小時✘◕╃✘,用去離子水洗淨至PH中性✘◕╃✘,並抽乾▩✘。
        3₪✘▩、將抽乾的纖維素再浸泡在0.5mol/l的NaOH溶液中2小時✘◕╃✘,用去離子水洗至中性✘◕╃✘,抽乾▩✘。即可用了▩✘。
        對於用過的纖維素✘◕╃✘,可以重複利用多次✘◕╃✘,但需要經過再生處理後才可以使用▩✘。再生處理可先用高濃度NaCl(1-2 mol/L)過柱沖洗柱床✘◕╃✘,以除去纖維素 DE-52陰離子交換纖維所吸附的成份▩✘。然後✘◕╃✘,再用0.5 mol/L的HCl和NaOH處理✘◕╃✘,處理方法與預處理*相同▩✘。
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